检测项目

指纹图谱相似度评价

  • 相似度计算：相关系数法与夹角余弦法（相似度≥0.90判定）
  • 整体轮廓比对：供试品图谱与对照图谱特征峰匹配率、非共有峰比例（≤10%）

共有峰标定与指认

  • 共有峰确认：多批次供试品色谱峰自动匹配（相对保留时间RSD≤1.0%）
  • 特征峰归属：对照品逐一比对保留时间与在线光谱一致性

指标成分含量测定

  • 单指标外标法定量：黄芩苷、绿原酸、芍药苷等（mg/g，线性相关系数r≥0.999）
  • 一测多评测定：以相对校正因子换算多组分含量（与外标法相对偏差≤5%）

方法学考察

  • 精密度试验：同一供试品连续进样6次，特征峰相对保留时间与峰面积RSD≤2%
  • 重复性与稳定性：平行制备6份（RSD≤3%）、24小时内多点进样考察

色谱峰纯度检验

  • 峰纯度判定：二极管阵列通道前沿与后沿光谱一致性比对
  • 共流出干扰排查：加标试验与切换波长通道佐证

相对保留参数测定

  • 相对保留时间与相对峰面积统计（参照峰选定、α值计算）
  • 特征峰面积比值范围核定（峰间比例稳定性）

多批次一致性分析

  • 批间相似度矩阵呈现（批次聚类与热图）
  • 离群批次排查：相似度低于阈值批次的复核与复测

化学模式识别

  • 主成分分析：得分图与载荷图（累计贡献率≥80%）
  • 正交偏最小二乘判别分析：差异标志物筛选（VIP值≥1）

空白与系统适用性检查

  • 流动相空白与溶剂对照进样：基线噪音评估、溶剂峰剔除
  • 系统适用性试验：理论板数、分离度≥1.5、拖尾因子0.95~1.05

对照指纹图谱建立

  • 对照图谱生成：多批次均值法或中位数法（共有峰面积汇总统计）
  • 共有峰技术要求核对：出现率≥90%的色谱峰逐一标定

检测范围

1. 中药材与饮片： 根茎类、全草类、花果类等原料药的批次一致性与真伪评价

2. 中药配方颗粒： 中间体与成品特征图谱比对及指标成分转移率核算

3. 中药提取物： 投料提取物批间一致性验收与工艺稳定性监控

4. 中药口服制剂： 合剂、口服液等液体制剂整体轮廓与含量核查

5. 中药固体制剂： 丸剂、片剂、胶囊剂成品一致性评价

6. 经典名方开发样品： 基准样品与中试批次图谱比对

7. 药食同源产品： 代用茶、汤料包等原料特征成分筛查

8. 种源与产地样品： 不同产地药材化学轮廓差异比较

9. 研发工艺批次： 提取、纯化、浓缩工序前后图谱追踪

10. 采购验收比对： 来料与合同基准样品图谱一致性核验

检测方法

国家药典方法

  • 《中华人民共和国药典》2020年版 四部 通则0512 高效液相色谱法
  • 《中华人民共和国药典》2020年版 四部 通则9101 中药质量标准分析方法验证指导原则

行业技术要求

  • 中药指纹图谱相似度评价技术要求（相关系数法与夹角余弦法，相似度不低于0.90）
  • 中药配方颗粒特征图谱技术要求（特征峰匹配与相似度限度判定）

通用分析方法

  • 高效液相色谱二极管阵列通道全波长轮廓获取方法
  • 多批次色谱峰自动匹配与均值对照图谱生成规程

检测设备

1. 超高效液相色谱仪： LC-30A型（二元高压梯度，耐压上限130MPa，自动进样器控温4~15°C）

2. 高效液相色谱仪： LC-20A型（四元低压梯度，流速0.001~10mL/min，配柱温箱）

3. 二极管阵列通道组件： SPD-M20A型（波长范围190~800nm，全峰光谱采集用于峰纯度判定）

4. 液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪： LCMS-9030型（质量范围m/z 20~2000，用于未知特征峰归属解析）

5. 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪： LCMS-8045型（多反应监测模式，痕量指标组分定量）

6. C18反相色谱柱： 填料粒径1.7~5μm（150×4.6mm、250×4.6mm规格，理论板数≥8000）

7. 超声波提取装置： 功率500W（频率40kHz，控温室温至60°C，用于供试品制备）

8. 电子分析天平： 万分之一型（量程0~220g，读数精度0.1mg）

9. 超纯水机： 产水电阻率≥18.2MΩ·cm（用于流动相用水制备）

10. 相似度评价软件： 多批次峰自动匹配与均值对照图谱生成（相关系数法/夹角余弦法）