检测项目

MRM离子对优化：

  • 母离子筛选：正离子模式[M+H]+、负离子模式[M-H]-优先，规避加合离子与同位素峰干扰
  • 定量与定性离子对确认：定量对取丰度最高子离子，离子比率相对偏差±30%以内（参照SANTE/12682/2021）

碰撞能量调谐：

  • CE步进扫描：0~60eV范围、步长2~3eV，取子离子响应最高点为最佳碰撞能量
  • 透镜电压优化：去簇电压DP、入口电压EP逐级调谐，母离子与子离子传输效率最大化

基质效应评估：

  • 基质因子测定：提取后添加法计算MF（可接受范围0.85~1.15），柱后灌注法辅助定位抑制区间
  • 内标归一核查：同位素内标归一化基质因子在不同来源基质间RSD≤15%（参照药典通则9012）

线性与定量能力：

  • 标准曲线考察：6~8个浓度水平覆盖LLOQ至上限，加权拟合相关系数r≥0.995
  • LLOQ确认：信噪比S/N≥10，该水平准确度±20%、精密度RSD≤20%

精密度与准确度：

  • 批内批间精密度：低中高三个质控水平RSD≤15%（LLOQ水平≤20%），跨日跨批次考察
  • 准确度验证：质控样品回收测定85%~115%（LLOQ水平±20%），每水平不少于5个复孔

回收率与提取效率：

  • 提取回收率测定：目标物与内标分别考察，一般≥70%且批间一致性RSD≤15%
  • 前处理回收验证：固相萃取或液液萃取全程加标回收率80%~120%

残留效应评估：

  • 目标物残留核查：高浓度样品进样后空白进样响应≤LLOQ响应的20%
  • 内标残留核查：空白进样内标残留≤5%，必要时插入空白洗针程序

稀释可靠性验证：

  • 高浓度稀释适用性：高于曲线上限样品经5~6倍稀释后准确度85%~115%
  • 稀释基质匹配核查：稀释剂选择与空白基质等效性确证，排除响应畸变

稳定性测试：

  • 短期稳定性：室温放置4~24h、自动进样器24h测定偏差±15%以内
  • 冻融与长期稳定性：连续3次冻融循环、-20℃/-80℃冻存周期内偏差±15%以内

定性确证能力：

  • 保留时间一致性：与标准品保留时间偏差≤2.5%，同批内漂移≤1%
  • 双离子对确证：定量对与定性对同时检出且离子比率落入法规容许区间方可判定阳性

检测范围

1. 生物样品： 血浆、血清、尿液中药物及其代谢物的痕量定量，服务生物等效性与药动学研究

2. 食品与农产品： 针对蔬菜、水果、谷物中农药多残留开展MRM筛查与确证定量

3. 动物源性食品： 检测肉类、蛋奶中兽药残留与违禁添加物，执行法规限量的确证判定

4. 水质与环境样品： 针对水体、底泥中微量有机污染物建立高灵敏定量方法

5. 化妆品： 筛查并定量禁限用组分与违禁添加成分，覆盖激素、抗生素类目标物

6. 食品接触材料： 检测迁移试验溶液中低含量迁移物，评估接触安全性

7. 中药与植物提取物： 针对活性成分与外源污染物同步建立靶向定量方法

8. 多肽与蛋白药物： 基于特征肽段的MRM绝对定量，服务生物药质量研究

9. 发酵与生物工艺样品： 针对发酵液目标产物及副产物开展靶向监测

10. 靶向代谢组学： 针对特定代谢通路内数十至数百种代谢物建立绝对定量方法

检测方法

国际标准

  • EMA生物分析方法验证指南 EMEA/CHMP/EWP/192217/2009（含修订版）
  • FDA生物分析方法验证行业指南（2018年版）
  • 欧盟指令2002/657/EC 痕量分析性能标准与离子比率容许度
  • SANTE/12682/2021 农药残留分析质量控制程序指南

国家标准

  • 中国药典2025年版四部通则9012 生物样品定量分析方法验证指导原则
  • GB 23200.121-2021 植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法
  • GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法
  • GB/T 21312-2007 动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法
  • GB/T 27417-2017 化学分析方法确认和验证

检测设备

1. 三重四极杆液质联用仪： TSQ Quantis型（MRM采集，质量范围m/z 5~1500，最小驻留时间1ms）

2. 三重四极杆液质联用仪： Xevo TQ-XS型（质量范围m/z 2~2000，支持scheduled MRM动态触发）

3. 复合三重四极杆线性离子阱质谱仪： QTRAP 6500+型（扫描速率12000Da/s，MRM定量与增强子离子扫描联动）

4. 超高效液相色谱仪： ACQUITY UPLC I-Class型（系统耐压约15000psi，流速0.01~2.0mL/min）

5. 固相萃取装置： 24位型（反相、正相、混合型与离子交换柱兼容，氮吹联动）

6. 高速冷冻离心机： 转速≥15000r/min，控温0~4℃，用于蛋白沉淀与上清分离

7. 氮吹浓缩仪： 24通道型（控温室温至65℃，独立气路防交叉污染）

8. 十万分之一电子天平： 感量0.01mg，用于储备液与标准曲线溶液配制称量

9. 超纯水机： 电阻率18.2MΩ·cm，TOC≤50ppb，满足流动相用水要求