骨相关疾病动物模型检测_第三方检测机构-中化所检测中心

点击：丨发布时间：2024-01-25 15:34:34丨关键词：骨相关疾病动物模型检测

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骨相关疾病动物模型介绍

中科光析研究所动物模型药理药效研究中心经过多年的经验累积，多方验证和长期实践考验，建立了完善的、更贴合临床的动物模型库，可根据客户的需求提供各种有效的动物模型，用来检测药物的有效性。实验动物有比格犬、大小鼠、兔、豚鼠、小型猪等种类。

骨相关疾病动物模型项目

一、痛风性关节炎动物模型

1、尿酸单钠(MSU)诱导大鼠痛风模型

品系：NISTAR大鼠。痛风是人类特有的疾病，痛风性关节炎是尿酸钠(MSU)沉积于局部关节组织引起的炎症反应。由于部分哺乳动物如鼠、兔等体内的嘌吟代谢途径与人类不同，所以无法从干扰嘌岭代谢紊乱的方法来构建痛风性关节炎的模型，故造成尿酸单钠(MSU)诱痛风性关节炎一般方法是在模型动物的关节腔内直接注射MSU。大鼠一般参照Coderre法，大鼠局部关节注射MSU造成急性痛风导大鼠痛风模型性踝关节炎模型：将50LMSU溶液从右踝关节外侧后方以45注入大鼠关节腔内，诱导后2h出现均出现了痛风性关节炎体征。

2、尿酸单钠(MSU)诱导兔痛风模型

品系：新西兰白兔。痛风是人类特有的疾病，痛风性关节炎是尿酸钠(MSU)沉积于局部关节组织引起的炎症反应。由于部分哺乳动物如鼠、兔等体内的嘌呤代谢途径与人类不同，所以无法从干扰嘌呤代谢紊乱的方法来构建痛风性关节炎的模型，故造成痛尿酸单钠(MSU)诱风性关节炎一般方法是在模型动物的关节腔内直接注射MSU。兔剃除双侧膝关节周围的毛，对皮肤进行常规消毒，轻弯曲膝关

导免痛风模型节，从关节侧位或正中进针，将0.5LMSU溶液通过髌上韧带注入兔膝关节腔，造成急性痛风性关节炎模型。该模型与大鼠模型***区别在于，病灶部位位于膝关节，而大鼠模型位于踝关节。

二、类风湿关节炎动物模型(RA)

1、佐剂诱导大鼠RA模型(AA模型)

品系: SD大鼠。AA模型由Freund于20世纪50年代创立,又称弗氏佐剂关节炎,是研究免疫性关节炎动物模型的基本方法。弗氏佐剂分为完全佐剂(CFA)和不完全佐剂(IFA)。本模型大多采用大鼠造模。AA模型的病理特征主要表现为早期致炎部位的炎症反应,致炎后18 h，左足肿胀达峰值,持续3天后逐渐减轻,8天后再度肿胀,继发侧病变一般出现于致炎后的10天左右, 20天左右达到高峰，表现为对侧和前足肿胀，且进行性加重，行动不便。继发性对侧足爪在致炎后 10-18天出现以滑膜炎、滑膜纤维素沉着、关节囊肿胀为特征的关节周围炎症,第18-30天,表现为持续性软组织炎症，伴有骨质溶解性骨膜炎、骨膜新骨形成、单核细胞浸润、血管翳形成，关节完全粘连。AA模型是一种经典的 RA 造模方法，被广泛用于防治 RA 的实验研究中。AA模型在发病症状(关节肿胀及软骨破坏等)、病理表现(增生性滑膜炎及血管翳、炎性浸润和肉芽肿形成)及关节外症状(侵犯脾脏、肝脏、骨髓、皮肤和眼)等方面接近人类RA。其不足是AA模型无慢性病理过程以及自身抗体，且病变有自限性(造模AA大鼠4个月炎症自行消退)，与人类RA存在差异。但是尽管如此，本模型目前仍是药物筛选的常用模型之一。

2、胶原诱导大/小鼠RA模型(CLA模型)

品系: WSITAR大鼠/DBA/1J小鼠。CIA模型是Trentham于1977年首次建立的。典型的关节炎体征在初次免疫后14-16天之间出现，18-24 天(平均 21天) 病变最为严重。往往是动物的一侧后肢先出现典型的红肿现象，随之其余肢体也相继受累。一般前爪炎症发生率低，与前爪相比，后肢关节更易且更严重地受累。肿胀一般持续 5-8周，最终可导致关节畸形。本模型最常用的小鼠为DBA /1J小鼠, WISTAR大鼠模型成功率也接近90%6,如果使用C57BL/6小鼠,则需要改用鸡的胶原蛋白,因为C57BL/6小鼠对牛胶原诱导的关节炎具有抵抗性。CIA是公认的RA******模型,在免疫学、治疗效果评价及药物筛选等方面的研究都普遍适用。本模型缺点为:虽存在自身抗体,但无类风湿因子(RF)及抗核抗体,也无RA皮下结节、浆膜炎、血管炎等关节外表现。但本模型依旧是目前最主流和公认的模型。

三、骨性关节炎动物模型(OA)

1、Hulth法诱导大鼠/兔骨性关节炎模型

品系：SD/WISTAR大鼠，新西兰白兔。Huth模型法是最经典的关节内手术造模方法，具体操作：动物麻醉后固定于手术台上，四肢伸直，无菌条件下取膝关节内侧纵切口长约2c,显露膝关节，然后切断前后交叉韧带及内侧副韧带，并完整切除内侧半月板，保留关节软骨面不受损伤，之后彻底止血，冲洗关节腔，逐层缝合，术后不固定术肢，让其自由活动，可适当给予抗生素预防感染。该OA模型在造模第4周所有关节即有轻度的OA表现，第8周，40%的关节软骨明显变薄，发生严重的退变，第12周，

严重退变的关节达到60%。术后6周关节可出现类似OA中晚期改变。传统Huth模型对关节破坏比较大,造模时间太短，可能会导致治疗干预窗口期短，因此可能不适合作为药物干预模型。

2、ACLT法诱导大鼠/兔骨性关节炎模型

品系：SD/WISTAR大鼠，新西兰白兔。单纯前交叉韧带横断模型(ACLT)于1973年由Pod发明。ACLT术可以改变关节前向稳定，增大关节间活动度，增加骨摩擦，加快关节退行性变进程。ACLT术后第4周出现了关节积液及滑膜增生。软骨改变以糜烂，粗糙为主，部位集中于股骨内髁内侧、外髁关节面光滑如常。第8周时，软骨改变仍集中在股骨内髁关节面，以溃疡形成为主。目前一般认为ACLT术可在8周前迅速导致OA样退行性改变，8周后由于机体内的修复机制退化速度会有所减慢。2、4、6周时都属于OA早期，8周为中期，12周为晚期。与Huth模型相比，ACLT法对模型动物生理结构改变较少，是研究OA发病机制、药物治疗及观察如何延缓骨关节进展较好的模型。此外，由于关节镜下手术创伤更小，且出血少，大大降低了关节内积血和创伤性滑膜炎对实验结果的影响。

3、PCL法诱导兔骨性关节炎模型

品系：新西兰白兔。单纯后十字交叉韧带切断术(PCL)与ACLT法类似。后交叉韧带是膝关节内主要的后向稳定结构之一，对膝关节的稳定性和功能起着重要的作用。PCL术改变了膝关节后向稳定性。PCL术后膝关节在术后6周大体表现尚未有明显的退行性变，仅为软骨表层酪不平整，偶见少量簇聚的软骨细胞的轻度软骨损伤，术后3个月才出现明显的退行性改变。单纯PCL术后关节退行性变随时间延长有逐渐加重的趋势。

4、MMT法诱导大鼠/兔骨性关节炎模型

品系：SD/WISTAR大鼠，新西兰白兔。单纯半月板切除术(MM)。膝关节半月板有增加胫骨踝凹陷及衬垫股骨内外髁的作用，以增加关节的稳定性，缓冲关节腔震荡，半月板的缺失可增加关节间的磨损，加快关节软骨退行性变。MMT术是渐进性的骨关节损害，代表了人类OA的软骨损害的特点。此外MMT术能较好的模拟OA模型中的伤害性疼痛和神经性疼痛，有利于相关药物研究。

四、骨质疏松动物模型

1、去势诱导大鼠/兔骨质疏松模型(绝经后 骨质疏松)

品系: WISTAR大鼠,新西兰白兔。1969由Saville创建该模型。该方法已成为研究绝经后骨质疏松最常用的动物模型,是美国食品与药物管理局(FDA)和世界卫生组织(WHO)推荐的研究绝经后骨质疏松的******模型。此模型通过在无菌环境下手术切除双侧卵巢，使动物雌激素水平迅速下降，继发骨转换加强、骨吸收增加，造成骨质疏松。造模后的骨量减少主要是骨小梁减少，与绝经后妇女类似。FDA建议采用月龄 6-10 个月的大鼠，通常在去势后12周或更长时间可造模成功。但多项研究发现，6个月龄大鼠去卵巢8周即可成功建模。大鼠的平均寿命大约为3年, 1年半左右开始进入老年,人类绝经后骨质疏松症多在中年后期发生,因此6-12月龄大鼠是去卵巢动物模型最常用的,其中大鼠月龄越大,其病理表现越接近绝经后骨质疏松症的疾病特点。兔是良好的骨质疏松研究的模型动物。自然寿命4-6年，性成熟期为6个月左右，性成熟后骨骼即发育成熟，1 年以上达到老年。成熟的家兔体积比鼠大，可以提供更多的骨骼标本，进行反复血液标本采集，此外与人类相似，兔性成熟后不久，骺板钙化闭合，骨骼转化率快，重建周期约70天，短期内即可观察到骨组织变化，成年兔有完整的哈弗氏系统，因此比鼠更接近人类，但不足的是兔缺乏松质骨。去势模型是目前应用最广泛，认可度******的模型。

2、糖皮质激素诱导大鼠/兔骨质疏松模型(糖皮质激素继发性骨质疏松)

品系: WISTAR大鼠,新西兰白兔。由于糖皮质激素在临床应用广泛，其所致的骨质疏松症的发生率仅次于绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松，在继发性骨质疏松症中居首位。糖皮质激素可以增加RANKL的表达，下调护骨素(OPG) 水平，从而抑制成骨细胞分化、促进骨吸收和局部细胞凋亡，最终导致骨代谢的失衡，骨量丢失。同时可引起机体的钙、磷、维生素 D 和甲状旁腺素代谢的变化，促进骨吸收，最终导致骨代谢处于骨吸收大于骨形成的负平衡状态，出现骨量丢失，诱发骨质疏松。诱导途径有灌胃、口服、肌肉注射等。药物一般选用中效的强的松、甲基强的松龙，偶尔用高效地塞米松。大鼠模型重复性好，但是缺少哈佛氏系统、骨改建周期短、骨骼无法达到完全成熟，兔模型有完整的哈佛氏系统、骨转化快速、骨骼可完全发育成熟，不足的是兔缺乏松质骨。

3、SAMP6小鼠老龄化骨质疏松模型(老龄化骨质疏松)

品系: SAMP6小鼠。SAMP6小鼠是目前仅有的一种能证明增龄性脆性骨折的动物模型,其骨质疏松特点为低峰值骨密度、低峰值骨量、骨吸收亢进、骨形成能力低下以及骨脆性增加。SAMP6小鼠是研究老年性骨质疏松症最常用的动物模型，也是目前证实的一种随着年龄增长，骨折风险增加的动物模型。12月龄SAMP6小鼠胫骨近端骨小梁骨量减少17%，骨密度下降了17%，椎骨骨小梁骨量大约减少40%6,骨小梁厚度变薄,骨小梁数目减少。SAMP6小鼠4-5个月骨量达到峰值,之后随增龄骨量降低。目前SAMP6 小鼠广泛应用于老年性骨质疏松症的研究。

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