检测项目
纯度检测：
- HPLC纯度：主峰面积占比（≥98.0%，参照USP<123>）
- SDS-PAGE纯度：杂带比例（无可见杂带）
- SEC-HPLC纯度：单体含量（≥95%）
- ELISA活性：半最大效应浓度（EC50值）
- 细胞增殖活性：半抑制浓度（IC50值）
- 受体结合活性：解离常数（Kd值）
- BCA法：蛋白浓度（mg/mL）
- A280法：吸光度值（OD值，e=1.0）
- Lowry法：标准曲线线性（R²≥0.99）
- SDS-PAGE分子量：迁移率（kDa）
- 质谱分子量：精确质量（Da）
- MALDI-TOF分子量：峰分辨率（>10000）
- cIEF法：等电点值（pI值）
- 毛细管电泳法：迁移时间差（±0.1pH）
- DLS法：粒径分布（多分散指数≤0.2）
- SEC-MALS法：绝对分子量（误差±5%）
- qPCR法：残留量（≤10pg/mg）
- 荧光法：检测限（0.1pg/μL）
- ELISA法：残留量（≤100ppm）
- WesternBlot法：特异性条带（无交叉反应）
- LAL法：内毒素单位（≤0.5EU/mg）
- 凝胶法：凝集反应灵敏度（0.01EU/mL）
- 加速稳定性：降解率（40°C/75%RH下≤5%/月）
- 冻融循环：活性保留率（≥90%after3cycles）
- 长期稳定性：有效期（2-8°C下≥24个月）
检测范围
1.治疗性单克隆抗体：涵盖IgG1/IgG4亚型，检测重点在Fc受体结合活性、抗体依赖性细胞毒性（ADCC）及片段可结晶区（Fc）功能稳定性
2.重组细胞因子：如干扰素-α或白细胞介素-2，检测重点在生物活性剂量响应曲线、热稳定性及二硫键完整性
3.疫苗重组抗原：如HPVL1蛋白或SARS-CoV-2刺突蛋白，检测重点在纯度、免疫原性评估及佐剂兼容性
4.酶类重组蛋白：如重组限制性内切酶或聚合酶，检测重点在比活性、米氏常数（Km）及热失活动力学
5.生长因子：如表皮生长因子（EGF）或成纤维细胞生长因子（FGF），检测重点在细胞增殖活性、受体特异性及储存稳定性
6.融合蛋白：如Fc融合蛋白或标签融合蛋白，检测重点在分子大小均一性、标签完整性及功能域活性
7.诊断用重组抗原：如重组肝炎表面抗原，检测重点在特异性、灵敏度及批次间一致性
8.研究用重组蛋白：如His-tag或GST-tag蛋白，检测重点在标签去除效率、纯度及非特异性结合
9.生物类似药：如重组胰岛素类似物，检测重点在理化特性相似性、生物等效性及杂质谱
10.基因治疗载体蛋白：如病毒衣壳蛋白，检测重点在载体组装效率、感染滴度及残留杂质
检测方法
国际标准：
- USP<123>重组治疗性蛋白纯度检测
- ISO13485:2016医疗器械质量管理体系-蛋白检测要求
- EP2.6.1欧洲药典-蛋白分子量测定
- ICHQ6B生物技术产品特性检测
- GB/T35889-2018重组蛋白生物活性检测方法
- ChP2020三部中国药典-重组蛋白纯度与杂质检测
- YY/T1187-2010医疗器械用重组蛋白残留DNA检测
- GB/T38164-2019重组蛋白内毒素检测方法
检测设备
1.高效液相色谱系统：标准型号（流速范围0.1-5mL/min，检测波长190-900nm）
2.质谱仪：高分辨率型号（分辨率>30000，质量精度±1ppm）
3.酶标仪：微孔板阅读型号（波长范围200-900nm，精度±0.01OD）
4.电泳系统：SDS-PAGE电泳型号（电压范围50-300V，凝胶浓度8-15%）
5.动态光散射仪：标准型号（粒径检测范围1-1000nm，温度控制±0.1°C）
6.实时荧光定量PCR仪：qPCR型号（检测限1拷贝/反应，循环数40）
7.鲎试剂检测仪：LAL型号（灵敏度0.01EU/mL，孵育时间60min）
8.恒温恒湿箱：稳定性试验型号（温度范围-20°C至100°C，湿度控制±2%）
9.紫外-可见分光光度计：标准型号（波长范围190-1100nm，带宽1nm）
10.毛细管电泳仪：cIEF型号（pH梯度3-10，电场强度300V/cm）
11.细胞培养系统：CO2培养箱型号（温度控制±0.5°C，CO2浓度5%）
12.离心机：高速型号（最大转速20000rpm，容量1.5-50mL）
13.显微镜：倒置荧光型号（放大倍数40-1000x，分辨率0.2μm）
14.生物反应器：小型发酵型号（搅拌速度50-1000rpm，DO控制±5%）
15.冻干机：真空冷冻型号（温度范围-80°C至40°C，真空度