PCR检测

点击:90丨发布时间:2025-08-14 09:34:25丨关键词:CMA/CNAS/ISO资质,中析研究所,PCR检测

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参考周期:常规试验7-15工作日,加急试验5个工作日。

因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

检测项目

扩增性能检测:

  • 循环阈值:Ct值偏差±0.5(参照MIQE指南)
  • 扩增效率:Efficiency%范围90-110%
  • 动力学曲线:斜率标准值≥0.98
特异性验证:
  • 非靶标扩增:交叉反应率≤1%
  • 引物二聚体:熔解曲线单峰判定(Tm值偏差±0.5°C)
灵敏度评估:
  • 检测限:LOD≤5copies/μL
  • 定量限:LOQ≤10copies/μL(RSD≤15%)
定量精度分析:
  • 线性范围:R²≥0.99
  • 重复性:批内CV≤10%
  • 再现性:批间CV≤15%
熔解曲线检测:
  • 熔解温度:Tm值一致性±0.3°C
  • 峰形分析:半峰宽≤1.0°C
引物探针优化:
  • GC含量:40-60%范围
  • 二级结构:△G值≥-2.5kcal/mol
抑制剂干扰测试:
  • 内参基因:ΔCt≤2.0
  • 抑制剂耐受:如Hemin≤100μM浓度
产物确认:
  • 凝胶电泳:条带大小误差±3bp
  • 测序验证:同源率≥99.5%
稳定性监控:
  • 冻融循环:CV≤8%(-20°C,5次)
  • 长期保存:效期≥12月(-80°C)
污染控制:
  • 阴性对照:阳性率≤0.5%
  • UV处理:灭活效率≥99.9%

检测范围

1.临床血液样本:检测病原体核酸如SARS-CoV-2、HJianCe,重点评估Ct值精度和抑制剂干扰

2.组织活检标本:分析肿瘤基因突变如EGFR、KRAS,侧重灵敏度与特异性验证

3.环境水样:监测水质微生物如大肠杆菌O157:H7,检测重点为低浓度LOD和样品基质效应

4.食品基质:筛查转基因成分如MON810,强调引物特异性及扩增效率

5.法医学样本:进行STR分型(15个位点),核心检测扩增均一性和产物大小准确性

6.植物材料:诊断病原真菌如Fusariumspp.,重点验证熔解曲线和交叉反应

7.动物组织:检测寄生虫DNA如Toxoplasmagondii,侧重灵敏度达1copy/μL和抑制剂耐受

8.空气过滤器样本:分析空气传播病毒如流感病毒,检测重点为核酸回收率和扩增稳定性

9.土壤样品:评估微生物群落16SrRNA基因,核心检测定量精度和抑制剂控制

10.化妆品成品:鉴定防腐剂基因工程成分,强调特异性验证和法规符合性

检测方法

国际标准:

  • ISO22174:2005食品微生物检测PCR方法
  • CLSIMM19-A2传染病定量分子检测指南
  • ISO17822:2020体外诊断PCR性能验证规范
国家标准:
  • GB/T37879-2019核酸检测试剂盒性能评价方法
  • GB/T19495.2-2004转基因植物检测PCR方法
  • GB/T34796-2017核酸扩增检测通用要求
方法差异说明:ISO标准要求严格验证所有参数,而GB标准更注重国内应用场景;CLSI指南强调实时荧光校准,GB/T34796则规范基础扩增步骤

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪:CFX96Touch™型(检测通道6色,温度精度±0.2°C)

2.热循环仪:Veriti™96-Well型(温度均匀性±0.5°C,升降温速率4°C/s)

3.电泳系统:Owl™D3型(电压范围50-300V,凝胶尺寸15x10cm)

4.核酸提取仪:MagMAX™Express-96型(通量96样本/run,提取效率≥95%)

5.紫外分光光度计:NanoDrop™One型(检测限2ng/μL,波长范围190-850nm)

6.微量离心机:Centrifuge5425型(最大RCF21900xg,容量24x1.5mL)

7.超净工作台:Purifier™Logic+型(HEPA过滤效率99.99%,风速0.45m/s)

8.微量移液器:Research®plus型(精度±0.5%at10μL,量程0.1-1000μL)

9.凝胶成像系统:GelDoc™XR+型(分辨率5MP,动态范围3.5OD)

10.恒温混匀仪:ThermoMixer®C型(温度范围-10°Cto100°C,转速300-1500rpm)

11.高压灭菌器:3870EA型(容积75L,温度121°C,压力0.22MPa)

12.超低温冰箱:Forma®-86°C型(温度均匀性±3°C,容量700L)

13.PCR板封膜机:PX1™型(密封时间1-5s,兼容96/384孔板)

14.振荡器:KS260control型(振幅3mm,频率300-3000rpm)

15.纯水系统:IQ7000型(电阻率18.2MΩ·cm,产水速率2L/min)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。