外泌体分离纯度验证测试

点击：93丨发布时间：2025-07-26 11:20:59丨关键词：CMA/CNAS/ISO资质，中析研究所，外泌体分离纯度验证测试

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参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。

检测项目

形态学特性：

• 粒径分布：50-150nm（参照ISO22412）
• 形态结构：杯状或球形确认（透射电镜观察）
• 颗粒浓度：10^8-10^11particles/mL（动态光散射法）

• CD9/CD63/CD81检测：阳性率≥90%（流式细胞术）
• TSG101/Alix验证：阳性率≥85%（WesternBlot）
• 阴性标志物排除：Calnexin阴性（阴性率≤5%）

• 蛋白质含量：≤20μg/mL（BCA法）
• 核酸残留：DNA≤50ng/mL，RNA完整性RIN≥7.0
• 脂质组分：磷脂酰丝氨酸阳性（AnnexinV结合）

• 细胞摄取效率：≥80%（荧光标记追踪）
• 增殖抑制测试：抑制率标定（参照ISO10993-5）
• 分泌因子分析：TGF-β/IL-10表达量测定

• 血清蛋白残留：BSA≤5μg/mL（ELISA）
• 高分子量杂质：>200nm颗粒占比≤1%
• 内毒素水平：≤0.1EU/mL（LAL法）

• 粒径变化率：储存后偏差≤10%
• 标志物衰减：阳性率下降≤5%（-80℃保存）
• 冻融耐受：循环三次完整性保持≥95%

• 外泌体回收率：≥70%（超速离心法）
• 样本均一性：RSD≤5%（多次重复）
• 浓度线性：R^2≥0.99（稀释系列）

• 非外泌体颗粒排除：微泡占比≤2%
• 细胞碎片清除：DNAse处理残留≤1ng
• 交叉污染控制：阴性对照无信号

• miRNA含量：特定miR-21表达量
• 蛋白质组分析：≥50个外泌体蛋白鉴定
• 代谢物谱：LC-MS检测关键代谢物

• 细胞毒性：存活率≥90%（MTT法）
• 免疫原性：IL-6释放量≤10pg/mL
• 溶血测试：溶血率≤5%（参照ISO10993-4）

检测范围

1.细胞培养基来源外泌体：重点检测血清蛋白残留和高分子量杂质，确保无胎牛血清污染干扰功能性分析

2.血清血浆来源外泌体：侧重脂蛋白去除效率和非外泌体颗粒定量，验证临床样本适用性

3.尿液来源外泌体：关注盐分结晶和细胞碎片清除，提高泌尿疾病标志物检测精度

4.脑脊液来源外泌体：重点排除血脑屏障蛋白残留，确保神经退行性疾病研究样本纯度

5.母乳来源外泌体：检测脂肪滴和免疫球蛋白污染，优化母婴营养传递评估

6.肿瘤组织来源外泌体：侧重癌细胞特异标志物表达和DNA残留，支持癌症诊断准确性

7.干细胞培养上清外泌体：验证分化因子无损失和微生物污染，用于再生医学应用

8.植物提取外泌体：检测植物蛋白和多糖残留，确保农业生物技术样本适用性

9.工程化修饰外泌体：聚焦表面配体结合效率和载体稳定性，用于药物递送系统验证

10.冷冻保存样本外泌体：评估冻融循环后形态完整性和功能衰减，优化储存条件

检测方法

国际标准：

• ISO21360:2019纳米粒子浓度测定方法
• ISO10993-5:2009体外细胞毒性试验
• ISO22412:2017动态光散射粒度分析
• ISEV-MISEV2018外泌体表征最低信息要求
• ASTME2524-08纳米颗粒跟踪分析规程

• GB/T39139.1-2020纳米材料检测指南
• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价
• GB/T35097-2018微纳米颗粒表征方法
• GB/T27417-2017体外诊断试剂稳定性评价
• GB/T37861-2019生物样本核酸提取规范

检测设备

1.纳米粒子跟踪分析仪：MalvernNanoSightNS300（检测范围20-2000nm，分辨率±5nm）

2.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（激光波长488nm/640nm，检测限50nm）

3.透射电子显微镜：JEOLJEM-1400Flash（加速电压80-120kV，放大倍数100k×）

4.动态光散射仪：WyattDynaProNanoStar（角度90°/173°，粒径范围1-1000nm）

5.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100（转速100,000×g，温度控制4-40℃）

6.酶标仪：ThermoScientificMultiskanSkyHigh（波长范围200-1000nm，精度±0.5%）

7.蛋白质印迹系统：Bio-RadChemiDocMP（检测限0.1ng，多色荧光）

8.液相色谱质谱联用仪：Agilent6495BQ-TOF（质量精度<2ppm，扫描速率20Hz）

9.PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio5（温度均一性±0.1℃，动态范围0.01-100ng）

10.细胞培养系统：EppendorfCellXpertC170（CO2控制5%，湿度90%）

11.内毒素检测仪：CharlesRiverEndosafeNexgen（灵敏度0.001EU/mL，检测时间15分钟）

12.荧光显微镜：OlympusIX83（物镜100×，NA1.45）

13.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600i（波长190-1100nm，带宽1nm）

14.离心浓缩仪：EppendorfVacufugePlus（真空度<5mbar，温度范围-10-60℃）

15.微流控芯片系统：FluidigmC1（单细胞捕获效率>85%，通量96样本）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。