食品中志贺氏菌核酸检测验证

点击：91丨发布时间：2025-06-26 18:34:51丨关键词：CMA/CNAS/ISO资质，中析研究所，食品中志贺氏菌核酸检测验证

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参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。

检测项目

核酸提取验证：

• DNA浓度：≥10ng/μL（参照ISO22174）
• 纯度检测：A260/A280比值1.8-2.0
• 提取效率：≥85%

• 扩增效率：90%-110%
• 熔解曲线分析：单峰Tm值±0.5℃
• 检测限验证：≤100CFU/g

• 引物探针特异性：无交叉反应
• 靶基因确认：ipaH基因阳性
• 非目标菌抑制：阴性对照无扩增

• 最低检测限：≤50CFU/mL
• 稀释系列验证：线性范围10^1-10^7copies/μL
• 回收率评估：≥80%

• 阳性符合率：≥95%
• 阴性符合率：≥98%
• 标准品验证：偏差±5%

• 批内变异系数：CV≤5%
• 批间变异系数：CV≤10%
• 重复检测次数：≥3次

• 试剂稳定性：有效期≥6个月
• 样本稳定性：冷藏≤72h保存
• 冻融循环：≤3次

• 常见干扰菌检测：大肠杆菌、沙门氏菌阴性
• 食品基质干扰：抑制率≤10%
• 内标基因验证：HPRT1基因稳定表达

• 不同食品类型适应：检测率≥90%
• 前处理优化：均质效率≥95%
• 抑制物去除：PCR抑制物清除率≥90%

• 阈值循环数：Ct值≤35
• 扩增曲线分析：指数期斜率≥0.95
• 标准曲线拟合：R²≥0.99

检测范围

1.生鲜蔬果：检测表面污染和内部渗透风险，重点验证样本均质化和抑制物去除效果。

2.肉类制品：涵盖生肉和熟肉加工过程污染，侧重屠宰后微生物控制和核酸稳定性验证。

3.乳制品：包括液态奶和奶酪产品，检测重点为脂肪基质干扰和低温保存样本处理。

4.水产品：鱼类和贝类样本，验证海水盐分抑制和高蛋白含量对核酸提取的影响。

5.加工食品：罐头和即食食品，检测重点为热加工后DNA片段化及防腐剂干扰。

6.婴儿食品：配方奶粉和辅食，侧重低生物量样本的灵敏度验证和安全控制。

7.调味品：酱料和香料，检测高盐、高酸条件下的PCR抑制物清除效率。

8.饮品：果汁和饮料，重点验证糖分和色素对扩增反应的抑制作用。

9.烘焙食品：面包和糕点，检测淀粉和油脂基质对核酸纯化的挑战。

10.冷冻食品：速冻蔬菜和肉类，验证冻融循环对DNA完整性的影响及低温储存样本处理。

检测方法

国际标准：

• ISO/TS15216-1:2017食品中病毒检测方法
• ISO22174:2005食品微生物学-分子检测方法
• ISO20838:2006食品和动物饲料微生物学-PCR方法

• GB4789.41-2016食品安全国家标准食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验
• GB/T27403-2008实验室质量控制规范
• GB/T33411-2016致病菌PCR检测试剂盒技术要求

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：QuantStudio7Flex（温度精度±0.1℃，通道数6）

2.核酸提取仪：KingFisherFlex（通量96样本，提取时间≤30min）

3.离心机：EppendorfCentrifuge5430R（转速15000rpm，温控范围-10℃至40℃）

4.电泳系统：Bio-RadGelDocXR+（分辨率≤5bp，紫外波长302nm）

5.分光光度计：NanoDropOne（检测范围2ng/μL-15000ng/μL，波长260nm）

6.恒温培养箱：MemmertINCO（温度范围20℃-60℃，精度±0.1℃）

7.无菌操作台：EscoAirstream（风速0.45m/s，HEPA过滤器效率99.99%）

8.微量移液器：EppendorfResearchplus（量程0.1μL-1000μL，精度±0.6%）

9.生物安全柜：NuAireClassII（气流速度0.5m/s，噪音≤65dB）

10.均质器：IJianCeMasticator（转速5000-30000rpm，处理量≤50mL）

11.超低温冰箱：ThermoScientificJianCeT（温度-86℃，容量700L）

12.水浴锅：JulaboTW12（温度范围5℃-99℃，精度±0.01℃）

13.振荡器：HeidolphTitramax1000（转速100-1500rpm，振幅3mm）

14.数据采集系统：AppliedBiosystemsDesignSuite（数据分析软件版本2.4，兼容多平台）

15.纯水系统：Milli-QIntegral（电阻率18.2MΩ·cm，产水量15L/h）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。