核酸提取试剂回收率测试

点击：91丨发布时间：2025-06-24 18:14:04丨关键词：CMA/CNAS/ISO资质，中析研究所，核酸提取试剂回收率测试

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参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。

检测项目

回收率性能：

• DNA回收率：回收百分比（90%~110%，参照ISO22118）
• RNA回收率：回收百分比（85%~105%，参照GB/T34797）
• 总核酸回收率：回收百分比（88%~108%）

纯度评估：

• OD260/OD280比值：1.8~2.0范围
• 蛋白质残留量：≤10ng/μL
• 盐类杂质检测：电导率偏差（±5%）

浓度测定：

• 核酸浓度：测量值（ng/μL）
• 浓度线性范围：50~5000ng/μL
• 校准曲线R²值：≥0.99

完整性检测：

• DNA片段大小：凝胶电泳条带完整性
• RNA完整性数：RIN≥7.0
• 降解率评估：降解百分比（≤5%）

特异性测试：

• 非靶核酸抑制率：抑制百分比（≤15%）
• 交叉反应性：特异性阈值（≥95%）
• 背景噪声控制：信噪比（≥30:1）

灵敏度分析：

• 最低检测限：LOD（0.1ng/μL）
• 定量限：LOQ（1ng/μL）
• 稀释线性度：斜率偏差（±10%）

重复性验证：

• 批内变异系数：CV（≤5%）
• 批间变异系数：CV（≤10%）
• 操作者间一致性：偏差（±3%）

交叉污染控制：

• 携带污染率：百分比（≤0.1%）
• 样本间残留检测：残留量（≤0.5ng）
• 阴性对照失败率：失败次数（≤1/10）

稳定性评价：

• 储存稳定性：回收率变化（±5%）
• 冻融循环耐受性：循环次数（≥3次）
• 温度敏感性：温度范围（4~25°C）

样本兼容性：

• 样本类型适配性：兼容样本种类（≥8类）
• 抑制剂耐受性：抑制物浓度（≤50mM）
• 基质效应评估：效应系数（0.8~1.2）

检测范围

1.全血样本：涵盖抗凝全血（如EDTA抗凝），重点检测红细胞裂解效率和DNA回收率一致性

2.血清血浆样本：包括血清和血浆（如肝素抗凝），侧重低浓度核酸提取和蛋白质残留控制

3.组织样本：如肝脏、肌肉组织匀浆，检测重点为细胞裂解彻底性和RNA完整性维护

4.细胞培养物：涵盖贴壁和悬浮细胞，聚焦细胞计数准确性和核酸产量稳定性

5.环境水样：如地表水和废水，强调微生物核酸回收率和抑制剂去除效果

6.法医样本：包括唾液、毛发和精斑，检测重点为微量DNA提取效率和交叉污染预防

7.植物样本：如叶片和种子，侧重多糖多酚去除和核酸纯度提升

8.微生物样本：包括细菌培养物和病毒颗粒，检测重点为裂解缓冲液适配性和回收率线性

9.临床拭子：如鼻咽拭子和口腔拭子，聚焦样本采集效率和高通量提取兼容性

10.食品基质：如肉类和乳制品，强调复杂基质干扰消除和核酸浓度准确性

检测方法

国际标准：

• ISO22118:2011分子生物学分析中核酸提取性能要求
• ISO21571:2005食品中核酸提取和纯化方法
• CLSIMM19-A2分子诊断中核酸提取物质量评估

国家标准：

• GB/T34797-2017核酸提取试剂性能测试方法
• GB/T35817-2018生物样本中RNA提取和检测
• YY/T1596-2017体外诊断试剂核酸提取技术要求

方法差异说明：国际标准ISO22118要求全程温度控制（4~25°C），而国家标准GB/T34797允许室温操作；ISO21571指定特定提取缓冲液组分，GB/T版本适应本地试剂配方；CLSIMM19-A2强调临床样本验证，YY/T1596聚焦医疗器械兼容性。

检测设备

1.核酸提取仪：QIAcubeHT型号（通量：96样本/批次，温控精度±0.5°C）

2.分光光度计：NanoDropOne型号（检测范围：2~15000ng/μL，分辨率0.1ng/μL）

3.荧光定量PCR仪：QuantStudio7Pro型号（动态范围：1×10^1~1×10^9copies/μL，精度±0.5Cq）

4.电泳系统：Bioanalyzer2100型号（片段分析范围：25~12000bp，分辨率±5bp）

5.离心机：Eppendorf5430R型号（转速范围：100~30000rpm，温度控制±1°C）

6.振荡混合器：VortexGenie2型号（速度范围：500~3000rpm，定时精度±1秒）

7.恒温孵育器：ThermoFisherHeratherm型号（温度范围：4~100°C，稳定性±0.1°C）

8.微孔板阅读器：SpectraMaxi3x型号（波长范围：200~1000nm，检测限0.001OD）

9.生物分析工作站：TapeStation4200型号（样本通量：16样本/运行，RIN分辨率≥0.5）

10.显微镜：NikonEclipse型号（放大倍数：40~1000倍，成像分辨率≥0.2μm）

11.超声波破碎仪：CovarisS220型号（频率范围：1~10kHz，功率调节±5W）

12.pH计：MettlerToledo型号（测量范围：0~14pH，精度±0.01pH）

13.低温存储柜：ThermoScientific型号（温度范围：-86~-20°C，稳定性±1°C）

14.自动移液器：EppendorfResearchPlus型号（容积范围：0.1~1000μL，误差≤1%）

15.无菌操作台：ESCO型号（气流速度：0.3~0.5m/s，洁净度Class100）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。