细菌总数测定(SRB/TGB/APB)

点击:2丨发布时间:2025-06-23 16:45:42丨关键词:CMA/CNAS资质,中析研究所,细菌总数测定(SRB/TGB/APB)

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参考周期:常规试验7-15工作日,加急试验5个工作日。

因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

检测项目

细菌计数方法:

  • 最大可能数检测:MPN值置信区间计算(参照ISO6222)
  • 平板计数法:菌落总数统计(CFU/mL)计数误差控制
  • 膜过滤法:过滤孔径(0.45μm)、培养时间优化

培养基特性评估:

  • 培养基成分检测:琼脂浓度(1.5-2.0wt%)pH值调整(6.5-7.5)
  • 营养源优化:碳源含量(≥0.1g/L)氮源比例(C/N比1:1)
  • 选择性培养基验证:抑制剂浓度(如硫酸盐≤0.05mol/L)

培养条件控制:

  • 温度参数:恒温范围(30±1°C)温度波动(≤±0.5°C)
  • 时间周期:最短培养(7天)、最长培养(28天)
  • 氧气环境:厌氧条件(氧分压≤0.1kPa)、需氧条件(氧分压≥20kPa)

细菌识别鉴定:

  • 形态学分析:菌落形状(圆形/不规则)颜色特征(白/黄)
  • 生化反应测试:还原酶活性(硫酸盐还原率≥90%)产酸能力(pH变化≤0.5)
  • 分子生物学确认:基因序列匹配度(≥99%)

污染水平评估:

  • 微生物负载检测:最大允许限值(CFU/mL≤100)、超标阈值
  • 腐蚀风险评估:SRB诱导腐蚀速率(≤0.1mm/year)
  • 生物膜形成能力:黏附强度(≥50kPa)

样品预处理标准:

  • 稀释方法:稀释倍数(10^-1至10^-6)误差控制(±5%)
  • 灭菌处理:灭菌温度(121°C)时间(15min)
  • 保存条件:冷藏温度(4°C)、保存期限(≤24h)

精度与重复性:

  • 检测限确定:最低检出浓度(1CFU/mL)
  • 重复性测试:相对标准偏差(RSD≤10%)
  • 回收率验证:回收率范围(90-110%)

环境因子影响:

  • 温度响应测试:生长速率(0.5-2.0OD/hour)
  • pH耐受性:生存pH范围(4.0-9.0)
  • 盐度适应检测:盐浓度(0-10wt%)

质量控制参数:

  • 阴性对照:无菌确认(CFU=0)
  • 阳性对照:标准菌株生长(ATCC7757)
  • 平行样品检测:平行数(≥3)一致性评估

报告生成标准:

  • 数据记录:原始计数表统计摘要
  • 结果解释:污染等级分类(低/中/高风险)
  • 合规性判定:标准符合性(参照ISO17025)

检测范围

1.工业循环水系统:冷却塔及锅炉水,重点检测SRB引起的微生物腐蚀及生物膜形成风险。

2.石油与天然气产品:原油燃料油及管线,侧重TGB和APB在储运过程的污染水平及酸化影响。

3.饮用水资源:自来水及地下水,核心评估APB导致的pH失衡及细菌总数限值控制。

4.土壤与沉积物样本:农田及河床沉积物,重点检测SRB厌氧活动对重金属迁移的影响。

5.生物膜样品:管道内壁及设备表面,聚焦TGB增殖导致的堵塞及卫生风险。

6.食品加工环境:接触面及加工用水,核心监控APB引起的腐败及安全指标超标。

7.制药洁净区:无菌生产环境,侧重SRB和TGB的微生物负载合规性检测。

8.海洋与河口样本:海水及沉积层,重点评估APB盐度耐受性及生态影响。

9.废水处理设施:活性污泥及出水,核心检测TGB去除效率及SRB厌氧降解能力。

10.腐蚀抑制剂材料:化学添加剂,侧重APB对抑制剂有效性的干扰测试。

检测方法

国际标准:

  • ISO6222:1999水质微生物检测(细菌总数平板计数法)
  • ASTMD4412-19硫酸盐还原菌检测(MPN法)
  • ISO11731:2017水中细菌检测(膜过滤技术)
国家标准:
  • GB/T5750.12-2006生活饮用水标准(细菌总数测定)
  • GB/T14643-2020工业循环水微生物检测方法
  • GB4789.2-2016食品安全国家标准(菌落总数测定)
方法差异说明:国际标准如ISO6222采用平板计数法,侧重需氧条件培养,而国家标准GB/T5750.12强化稀释步骤并增加厌氧培养选项;ASTMD4412使用液体培养基优化SRBMPN法,对比GB/T14643引入温度梯度控制以提升精度。

检测设备

1.恒温培养箱:ThermoScientificHeratherm(温度范围20-60°C,精度±0.1°C)

2.生物显微镜:OlympusCX43(放大倍数40-1000X,分辨率0.2μm)

3.菌落计数器:ProtoCOL3(自动计数精度≥99%,兼容平板尺寸90mm)

4.厌氧培养罐:AnaeroPack(氧分压控制≤0.01kPa,容量5L)

5.pH计:MettlerToledoSevenCompact(测量范围0-14,精度±0.01)

6.高压灭菌器:Tuttnauer3870EA(灭菌温度121-134°C,压力0.21MPa)

7.膜过滤装置:MilliporeStericup(过滤孔径0.22-0.45μm,流速100mL/min)

8.PCR仪:Bio-RadT100(温控精度±0.1°C,周期数40)

9.分光光度计:ShimadzuUV-1800(波长范围190-1100nm,吸光度精度0.001)

10.恒温水浴:MemmertWB22(温度稳定性±0.5°C,容量20L)

11.离心机:Eppendorf5425R(转速范围100-15000rpm,容量24×1.5mL)

12.菌株保存柜:ThermoScientificRevco(温度范围-86°C,冻存稳定性)

13.振荡培养器:InforsHTMtitron(转速50-300rpm,温度控制±0.2°C)

14.自动化稀释仪:GilsonPipetman(稀释精度±1%,支持10倍梯度)

15.电导率仪:HachHQ40D(测量范围0-200mS/cm,精度±0.5%)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

📝 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

⏳ 检测周期:7~15工作日,可加急。

🏅 资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

📏 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

🔬 非标测试:支持定制化试验方案。

📞 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。