阿胶块细胞毒性测试（MTT法）

点击：丨发布时间：2025-06-20 09:23:44丨关键词：阿胶块细胞毒性测试（MTT法）测试机构,阿胶块细胞毒性测试（MTT法）测试标准,阿胶块细胞毒性测试（MTT法）测试仪器

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参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。

检测项目

细胞毒性评估：

• 细胞存活率测定：生存百分比（≥80%作为安全阈值）、IC50浓度值计算（μg/mL）
• 细胞形态观察：异常变化评分（0-4级，参照ISO10993-5）

• 增殖抑制率测试：抑制百分比（0-100%）、倍增时间计算（小时）
• DNA合成检测：溴脱氧尿苷摄取量（BrdU指数）

• 活性氧水平测定：ROS荧光强度（相对单位）、超氧化物歧化酶活性（U/mg蛋白）
• 脂质过氧化检测：丙二醛浓度（nmol/mg蛋白）

• 凋亡率分析：AnnexinV阳性细胞百分比、半胱氨酸蛋白酶活性（Caspase-3单位）
• DNA片段化检测：梯状条带评分（0-3级）

• 乳酸脱氢酶释放量：酶活性单位（U/L）、膜通透性变化（荧光染料摄取率）
• 细胞膜电位测试：荧光强度比值（ΔΨm）

• 生长动力学分析：对数期斜率、饱和密度（cells/cm²）
• 群体倍增时间：小时值（依据GB/T16886.5）

• MTT转化效率：甲瓒吸光度（OD值，波长570nm）
• 细胞能量状态：ATP含量测定（nmol/millioncells）

• 周期分布测定：G0/G1、S、G2/M期百分比
• 周期阻滞分析：阻滞指数（参照ASTMF895）

• 毒性相关基因：p53表达水平（相对mRNA量）、Bcl-2/Bax比值
• 炎症因子检测：IL-6分泌量（pg/mL）

• 浓度梯度设置：阿胶提取液浓度范围（0.1-1000μg/mL）
• 时间依赖性测试：暴露时间（24h、48h、72h）效应曲线

检测范围

1.传统阿胶块原料：涵盖驴皮来源纯阿胶，重点检测提取液对成纤维细胞的毒性影响及残留杂质

2.加工处理阿胶制品：包括熬制浓缩阿胶，侧重温度处理对细胞毒性的改变及热降解产物评估

3.添加剂复合阿胶：涉及添加蜂蜜或药材的阿胶块，检测辅料相互作用导致的细胞应激响应

4.不同产地阿胶样本：如山东、河南等区域产品，重点评估地理因素对细胞毒性水平的变异

5.储存老化阿胶块：长期存放样本，侧重氧化变质引起的细胞损伤及保质期验证

6.阿胶提取浓缩液：水提或醇提液，检测浓度梯度对肝细胞系的特异性毒性

7.阿胶与药物配伍样品：结合中药复方，评估协同或拮抗细胞毒性效应

8.仿制阿胶替代品：非驴皮来源制品，重点检测伪品导致的异常细胞死亡机制

9.阿胶加工副产物：如废渣或废水，侧重环境毒性及细胞膜破坏程度

10.纳米化阿胶颗粒：纳米技术处理样品，检测粒径对细胞吞噬及毒性的影响

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5生物学评价第5部分：细胞毒性测试（MTT法，细胞接种密度1×10⁴cells/well）
• ASTMF895细胞毒性评估标准（采用L929细胞系，培养时间48小时）
• OECD487体外哺乳动物细胞基因突变试验（整合MTT法评估代谢抑制）

• GB/T16886.5医疗器械生物学评价第5部分细胞毒性测试（与ISO类似，但细胞培养时间默认72小时）
• GB/T5009.196食品安全标准细胞毒性检测（侧重食品添加剂MTT法，浓度梯度设置差异）
• GB/T5750生活饮用水标准检验方法（扩展至水溶性阿胶样品，吸光度测量波长调整为540nm）

检测设备

1.二氧化碳培养箱：ThermoScientificHeracell150i型（温度控制±0.1°C，CO2浓度5±0.2%）

2.酶标仪：BioTekSynergyH1型（波长范围200-1000nm，吸光度精度±0.005OD）

3.倒置显微镜：OlympusCKX53型（放大倍数40-400×，配备数码相机）

4.生物安全柜：EscoAirstreamAC2-4E1型（风速0.3-0.5m/s，HEPA过滤效率99.995%）

5.高速离心机：Eppendorf5810R型（最高转速15000rpm，温度控制范围-20°C至40°C）

6.恒温水浴锅：MemmertWB22型（温度范围室温至100°C，精度±0.1°C）

7.荧光显微镜：NikonEclipseTi2型（激发波长488nm，发射滤光片适配GFP/RFP）

8.超声波破碎仪：SonicsVibra-CellVCX750型（功率750W，频率20kHz）

9.电子天平：MettlerToledoMS105DU型（量程0.001g-220g，精度±0.001mg）

10.pH计：SartoriusPB-10型（测量范围0-14pH，分辨率0.001pH）

11.恒温摇床：NewBrunswickInnova42型（振荡速度30-300rpm，温度控制±0.5°C）

12.超净工作台：LabconcoPurifierClassII型（风速0.4m/s，粒子计数≤3.5个/ft³）

13.细胞计数仪：Bio-RadTC20型（检测范围0-1×10⁷cells/mL，精度±2%）

14.超低温冰箱：ThermoScientificForma900型（温度范围-86°C，稳定性±1°C）

15.微孔板振荡器：IKAMS3型（振荡频率300-1500rpm，振幅3mm）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。