人肝癌细胞检测

点击:90丨发布时间:2025-06-11 10:06:37丨关键词:CMA/CNAS/ISO资质,中析研究所,人肝癌细胞检测

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参考周期:常规试验7-15工作日,加急试验5个工作日。

因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

检测项目

细胞基本特性检测:

  • 细胞鉴定:STR分型(≥18个位点)、种源验证(同工酶电泳ISO10993-22)
  • 活力检测:MTT法(OD570nm±0.05)、台盼蓝拒染率(≥95%)
增殖与凋亡检测:
  • 增殖动力学:倍增时间(h,CCK-8法)、克隆形成率(≥50个/皿)
  • 凋亡分析:AnnexinV+/PI-比例(流式细胞术)、Caspase-3活性(μmol/min/mg)
侵袭转移能力检测:
  • 迁移实验:Transwell穿膜数(24h,≥200/视野)
  • 侵袭实验:Matrigel基质穿透率(vs.对照组%)
  • 上皮间质转化:E-cadherin/Vimentin表达比(WB灰度值)
细胞周期分析:
  • 周期分布:G0/G1、S、G2/M期占比(PI流式,CV≤5%)
  • DNA含量:增殖指数(PI=(S+G2/M)/(G0/G1+S+G2/M))
药物敏感性检测:
  • IC50测定:梯度浓度剂量反应(96孔板,n=6)
  • 耐药指数:P-gp表达量(流式MFI值)
代谢功能检测:
  • 糖酵解能力:乳酸产量(mmol/10^6细胞)
  • 线粒体活性:ATP浓度(nmol/mg蛋白)
基因表达分析:
  • qPCR检测:AFP/ALBmRNA比值(2^-ΔΔCt法)
  • 突变筛查:TP53exon5-8测序(覆盖率≥99%)
蛋白组学检测:
  • WesternBlot:目标蛋白灰度值(β-actin校正)
  • 磷酸化检测:p-Akt/Akt比值(ELISA,pg/mg)
血管生成实验:
  • 管腔形成:Matrigel内皮网孔数(6h,≥40/视野)
  • VEGF分泌:ELISA检测(pg/ml/24h)
致瘤性验证:
  • 裸鼠成瘤:肿瘤体积(mm³/周)、转移灶计数
  • PDX模型:传代成功率(≥P3)

检测范围

1.永生化肝癌细胞系:HepG2、Hep3B、Huh-7、PLC/PRF/5等,重点检测标准培养条件下的基础生物学参数

2.原代肝癌细胞:手术切除肿瘤组织分离细胞,检测限传代≤P5,聚焦个体化药敏与突变谱

3.肝癌干细胞:CD133+或EpCAM+分选群体,侧重球囊形成率与干性基因表达

4.转移性肝癌细胞:高转移亚系(如MHCC97-H),强化侵袭伪足形态学分析

5.基因编辑细胞:CRISPR/Cas9靶向修饰模型,验证编辑效率≥90%

6.耐药株模型:索拉非尼/顺铂长期诱导株,检测ABC转运蛋白活性

7.共培养体系:肝癌细胞-星状细胞共培养,侧重细胞因子交互作用

8.3D类器官:患者来源类器官(PDO),检测结构完整性≥21天

9.循环肿瘤细胞:CTC富集样本,鉴定上皮-间质混合表型

10.冻存复苏细胞:液氮冻存后细胞,验证复苏存活率≥85%

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5:2009医疗器械细胞毒性评价(MTT/LDH法)
  • ASTMF2944-21三维细胞迁移检测指南
  • CLSIEP17-A2检测限与定量限评估
国家标准:
  • GB/T39730-2020细胞计数通用要求
  • GB/T35823-2018干细胞检测通用要求(类器官适用)
  • YY/T1561-2017流式细胞仪校准规范
方法差异:ISO10993-5要求阴性对照OD值≥0.8,GB/T39730规定血球计数板深度0.1mm;ASTMF2944明确Matrigel浓度8-12mg/ml,国标对3D培养尚无专项标准

检测设备

1.倒置荧光显微镜:OlympusIX83(40x相衬/60x油镜,EMCCD相机)

2.流式细胞仪:BDFACSAriaIII(3激光8色,分选纯度≥98%)

3.微孔板读数仪:ThermoMultiskanSkyHigh(波长范围340-850nm,CV≤1%)

4.实时细胞分析仪:ACEAxCELLigenceRTCA(阻抗检测频率10kHz-10MHz)

5.激光共聚焦显微镜:ZeissLSM980(GaAsP检测器,Z轴分辨率0.3μm)

6.全自动细胞计数仪:CountstarIC1000(双荧光通道,粒径检测2-200μm)

7.梯度PCR仪:Bio-RadT100(温控精度±0.1℃,升降温速率5℃/s)

8.蛋白印迹系统:Bio-RadChemiDocMP(化学发光/荧光双模式)

9.超速离心机:BeckmanOptimaXPN-100(最大转速100,000rpm)

10.活细胞工作站:PerkinElmerOperaPhenix(水汽/CO2浓度控制±0.1%)

11.显微操作仪:EppendorfTransferMan4m(定位精度0.05μm)

12.气相液氮罐:ChartMVEXC47/11(液相保存量47L,气相温度-190℃)

13.电转染系统:BTXECM830(电压范围5-500V,脉冲宽度10μs-100ms)

14.酶标分析系统:MolecularDevicesSpectraMaxi3x(光吸收/荧光/发光三模)

15.生物安全柜:ESCOA2型(下降风速0.35±0.025m/s,HEPA过滤≥99.99%)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。