核酸甲基转移酶检测

点击：丨发布时间：2025-04-29 17:09:53丨关键词：核酸甲基转移酶测试方法,核酸甲基转移酶测试案例,核酸甲基转移酶测试标准

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参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。

检测项目

1. 酶活性测定：采用放射性标记S-腺苷甲硫氨酸（SAM）或荧光底物法，测定单位时间内甲基转移量（pmol/min/mg）

2. 底物特异性分析：针对不同核酸序列（CpG岛、非CpG位点）的甲基化效率差异测试

3. 动力学参数测定：包括Km值（0.5-50 μM SAM）、Vmax（5-200 nmol/min）及kcat（0.1-5 s⁻¹）

4. 抑制剂筛选：IC50值测定（浓度范围0.1 nM-100 μM）及作用机制验证

5. 热稳定性测试：通过差示扫描量热法（DSC）测定Tm值（45-75℃）

检测范围

1. 重组蛋白：大肠杆菌/哺乳动物表达系统生产的DNMT3A、DNMT1等甲基转移酶

2. 细胞裂解液：肿瘤细胞系/原代细胞的天然酶活性检测

3. 体外转录产物：含特定甲基化位点的RNA/DNA底物制备验证

4. 临床样本：外周血单核细胞中DNMT活性水平监测

5. 药物制剂：表观遗传治疗药物的酶抑制效力评价

检测方法

1. ISO 20647:2018《分子生物学检测-DNA甲基转移酶活性测定指南》

2. ASTM E3060-16《荧光法测定核酸修饰酶活性的标准方法》

3. GB/T 37870-2019《DNA甲基化检测通用技术要求》

4. GB/T 35537-2017《体外诊断试剂用蛋白质制品通用技术要求》

5. ISO 10993-18:2020《生物样品中酶活性测定的标准化流程》

检测设备

1. Thermo Fisher NanoDrop Onec微量分光光度计（蛋白浓度测定）

2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统（SAM代谢产物分析）

3. Beckman Coulter DTX 880多功能酶标仪（荧光强度检测）

4. Malvern Panalytical MicroCal PEAQ-DSC差示扫描量热仪（热稳定性分析）

5. PerkinElmer Tri-Carb 4910TR液闪计数器（放射性同位素检测）

6. Bio-Rad CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪（DNA甲基化水平定量）

7. Waters Xevo TQ-S质谱仪（甲基化位点精确鉴定）

8. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪（体外甲基化反应体系构建）

9. GE Healthcare ÄKTA pure 25蛋白纯化系统（重组酶纯化验证）

10. Sartorius Cubis II MSA225S-1CE天平（精密称量±0.01 mg）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。