核酸样品降解检测
点击：90丨发布时间：2025-08-19 10:41:24丨关键词：CMA/CNAS/ISO资质，中析研究所，核酸样品降解检测
参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。
因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。
CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师。
检测项目
分子完整性检测：
- 片段大小分布：平均长度（bp范围100-10000）、峰值比例（≥60%，参照ISO20395:2019）
- 降解指数：DI值计算（DI≥1.5表示降解）
- 完整性评分：RIN值（RNA完整性数≥7.0）
- DNA浓度：ng/μL（精度±5%，参照GB/T37864-2019）
- RNA纯度：A260/A280比值（1.8-2.0）
- 污染物检测：A260/A230比值（≥1.8）
- Qubit测定：荧光强度（范围0.1-1000ng）
- SYBRGreen染色：降解阈值（≤20%片段损失）
- 降解产物检测：荧光信号偏移（波长偏差±5nm）
- 琼脂糖凝胶电泳：片段迁移率（分辨率1-50kb）
- 毛细管电泳：片段分辨率（≥1bp）
- 迁移距离：标准分子量标记匹配度（偏差≤5%）
- 扩增效率：Ct值差异（ΔCt≤2）
- 产物大小：PCR片段长度（预期范围±10bp）
- 假阴性率：降解样本检出限（≤5%）
- 28S/18S比值：≥1.8
- rRNA完整性：降解率计算（%/hour）
- 热敏感性：70°C降解速率（≤10%/min）
- RNase活性：活性单位（≤0.001U/mL）
- DNase残留：阴性对照要求（无扩增）
- 酶抑制测试：抑制剂浓度（≤0.1μg/mL）
- 热降解实验：降解率（%/minat70°C）
- 冻融循环：完整性变化（≤5%degradation）
- 室温暴露：稳定性时限（≤1小时）
- 长期储存：降解速率（%/monthat-80°C）
- 短期保存：冷藏稳定性（≤48小时）
- 冻干样品：复水后完整性（≥95%）
- 寡核苷酸片段：长度分布（<200bp）
- 碱基损伤：氧化损伤率（≤1%）
- 末端完整性：5'端磷酸化水平（≥90%）
检测范围
1.临床血液样品：侧重DNA提取后降解评估，防止PCR假阴性，重点检测冻融循环影响和RNase污染。
2.组织活检样品：涵盖福尔马林固定石蜡包埋组织，检测重点为片段大小分布和A260/A280比值偏差。
3.细胞培养样品：针对悬浮或贴壁细胞，评估RNA完整性数（RIN）和热降解速率，确保qPCR可靠性。
4.环境微生物样品：包括土壤或水体核酸，侧重污染物水平和降解指数，防止扩增失败。
5.法医样品：涉及陈旧血痕或毛发，检测重点为低浓度DNA的片段大小分布和假阴性风险评估。
6.古DNA样品：涵盖化石或考古样本，评估降解产物和碱基损伤，优化测序适配性。
7.植物组织样品：针对叶片或根系，检测多糖污染和片段迁移率，确保文库构建质量。
8.病毒RNA样品：包括流感或冠状病毒，侧重RNase活性和冻融完整性变化，保障诊断准确性。
9.细菌基因组DNA：涉及革兰氏阳性菌，评估浓度精度和PCR扩增效率，防止梯度稀释误差。
10.合成核酸样品：涵盖寡核苷酸或引物，检测末端完整性和降解阈值，优化克隆实验。
检测方法
国际标准：
- ISO20395:2019核酸降解检测方法（采用毛细管电泳分辨率≥1bp）
- ASTME3135-18RNA完整性评估指南（聚焦RIN值计算）
- ISO17025:2017测试与校准实验室能力（涵盖精度控制）
- GB/T37864-2019DNA降解检测方法（偏好凝胶电泳迁移率分析）
- GB/T34798-2017核酸纯度光谱检测（UV吸光度A260精度±0.01）
- GB/T30988-2014RNA提取与检测（强调28S/18S比值）
检测设备
1.凝胶电泳系统：Bio-RadGelDocXR+（分辨率1-50kb）
2.毛细管电泳仪：Agilent2100Bioanalyzer（片段分辨率≥1bp）
3.荧光定量仪：ThermoFisherQubit4.0（检测范围0.1-1000ng）
4.分光光度计：NanoDropOne（波长范围190-840nm）
5.PCR仪器：AppliedBiosystems7500（温控精度±0.1°C）
6.离心机：Eppendorf5425R（转速范围100-15000rpm）
7.生物分析仪：AgilentTapeStation（自动化片段分析）
8.微量天平：SartoriusCubis（精度0.001mg）
9.核酸提取仪：QiagenQIAcube（通量96样本/小时）
10.冷冻柜：ThermoScientificJianCeT（温度范围-86°C）
11.热循环仪：Bio-RadT100（升温速率4°C/s）
12.荧光显微镜：OlympusIX83（激发波长488nm）
13.恒温水浴锅：MemmertWNB14（温度稳定性±0.1°C）
14.振荡器：IKAMS3（转速50-1500rpm）
15.紫外透射仪：VilberLourmatTFX-20M（波长302nm）
北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】
报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期：7~15工作日，可加急。
资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试：支持定制化试验方案。
售后：报告终身可查，工程师1v1服务。
前沿项目